ISSN 1991-3087

Свидетельство о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-24978 от 05.07.2006 г.

ISSN 1991-3087

Подписной индекс №42457

Периодичность - 1 раз в месяц.

Вид обложки

Адрес редакции: 305008, г.Курск, Бурцевский проезд, д.7.

Тел.: 8-910-740-44-28

E-mail: jurnal@jurnal.org

Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100
Яндекс.Метрика

Изучение метаболитов арахидоновой кислоты и иммунных параметров при атопическом дерматите

 

Азизова Гюльнара Ибрагим кызы,

доцент кафедры биохимии,

Гасанова Шайман Ибрагим кызы,

доцент кафедры биохимии.

Научный консультант – доктор биологических наук, профессор, зав. кафедрой биохимии

Ариф М. Эфендиев.

Азербайджанский медицинский университет.

 

В настоящее время во многих странах регистрируется устойчивая тен­денция к росту числа аллергических заболеваний. Особое внимание уделя­ет­ся проблеме атопического дерматита (АД) в связи с его высоким удельным весом в структуре как аллергологической, так и дерматологической патоло­гии. По данным литературы, АД имеют от 4 до 23% детей [1-4]. У части де­тей формируются тяжелые формы заболевания, торпидные к традиционной терапии, имеющие прогрессирующее течение и приводящие к инвалидизации и снижению качества жизни [5].

Центральная роль в патогенезе АД отводится иммунной системе; забо­левание рассматривается, как хроническое аллергическое иммуноза­ви­симое воспаление с генетической предрасположенностью к атопии и признаками развития вторичного иммунодефицитного состояния [6].

В последние годы опубликованы результаты исследования большого ко­личества исследований, посвященных изучению иммунитета (неспецифи­ческого, клеточного, гуморального) у больных АД.

Целью настоящей работы явилось изучение роли антител G класса и их авидитета при атопическом дерматите; определение соотношения высоко- и низкоавидных антител, а также взаимосвязи между метаболитами арахидоно­вой кислоты и иммунными показателями.

 

Материалы и методы

 

Под наблюдением находилось 60 больных с АД в возрасте 14-40 лет (муж­чин 63%, женщин – 37%). У большинства больных заболевание начина­лось с первых лет жизни, при этом длительность заболе­ва­ния у некоторых больных составляла 10-25 лет. Сопутствующей патоло­ги­ей чаще всего явля­лись аллергические заболевания – 50% и болезни желу­доч­но-кишечного трак­та – 30%. У 15% больных близкие родственники имели аллергические заболевания. Группой контроля служили 10 здоровых доноров в возрасте 16-30 лет.

Исследования проводились в биохимической лаборатории АМУ и в Институте Биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова в г. Москве. Содержание метаболитов арахидоновой кислоты – ЛТС4, ЛТВ4 и прос­тагландинов определяли методом колоночной хроматографии на крем­ние­вой кислоте с последующим анализом с помощью наборов реагентов «Amer­sham» (Англия), «Clinical Assay» (США) [7].

Оценку протективной активности В-системы иммунитета проводили на основании анализа конформационного состояния молекулы IgG и авидитета антител, для чего IgG1 выделяли из сывороток крови доноров и больных АД методом хроматографии на ДЭАЭ сефарозе. Чистоту полученных препаратов подтверждали методом электрофореза в полиакриламидном геле и методом ра­­диальной иммунодиффузии по Ухтерлони с применением коммерческих ан­­­ти­сывороток к классам иммуноглобулинов и подклассам IgG человека, а также с помощью N-концевого секвенирования Fab и Fc фрагментов мето­дом Эдмана. Fc фрагмент получали путем гидролиза иммуногло­були­нов трип­­­сином. Гидролиз проводили в 0,05 M NH4HCO3 буфере, pH 7,8, при 37°C, в течение 24 ч, при соотношении фермент: субстрат 1:20. Полученные фрагменты разделяли при помощи ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-сефарозе [8-9].

Статистическую обработку полученных результатов проводили с по­мощью параметрических критериев пакета Biostat, 1998. Достоверность зна­чи­­мых различий средних показателей иммунитета оценивали с помощью пар­ного t-критерия Стъюдента.

 

Результаты исследования и их обсуждение

 

Данные о содержании метаболитов арахидоновой кислоты у больных АД представлены в таблице 1. Для сравнительного анализа изученных пока­за­телей в периоде обострения все больные были разделены на 3 группы:

I группа – пациенты с неосложненным течением распространенного АД (n=20);

II группа – пациенты с осложненным течением распространенного АД (n=22);

III группа – пациенты с осложненным течением диффузного АД (n=18).

Полученные данные указывает на то, что в периоде обострения забо­ле­вания существенно увеличивается содержание ЛТС4, ЛТВ4. Уровень прос­тагландинов практически не отличался от показателей у здоровых людей.

 

Таблица 1.

Содержание метаболитов арахидоновой кислоты у больных атопическим дерматитом.

Исследуемый показатель

Здоровые доноры

Больные

1-ой группы

Больные

2-ой группы

Больные

3-й группы

Лейкотриен С4 (ЛТС4), пг/мл

2413 ± 120

4085 ± 285**

4265 ± 145**

4326 ± 156***

Лейкотриен В4 (ЛТВ4), пг/мл

1193 ± 120

2837 ± 608*

2706 ± 243*

4570 ± 379*

Лейкотриен

С4 /D4 /E4, пг/мл

4348 ± 762

11165 ± 1770**

 9621 ± 657*

 19379 ± 685*

Простагландин F2a (ПГFa), пг/мл

539 ± 35,2

1174 ± 103 ***

553 ± 51,6**

593 ± 79,3*

Простагландин E2 (ПГE2) , пг/мл

685 ± 40,1

1148 ± 104 ***

667 ± 84,3*

507 ± 66,3*

Прим.: * p<0,05 ** p<0,01*** p<0,001.

 

На основании корреляционного анализа удалось выявить две группы функционально значимых связей авидетета антител G класса с показате­ля­ми иммунограммы: с одной стороны – с ЦИК, фагоцитарной активностью ней­трофилов, способностью нейтрофилов генерировать радикалы кислорода, т.е. с комплексом показателей, которые характеризуют течение реакций, обес­пе­чивающих фагоцитоз аллергенсодержащих ЦИК, разрушение аллерге­нов и атопенов и выведение их из организма; с другой – с количеством ме­та­болитов арахидоновой кислоты – Л ТС4 ЛТВ4 и т.п.

 

Таблица 2.

Иммунологические показаетли у больных АД.

Исследуемый показатель

Здоровые доноры

Больные

1-ой группы

Больные

2-ой группы

Больные

3-й группы

Лейкоциты, x109/л

5,2 ± 0,1

5,69 ± 0,51*

5,72 ± 0,14*

6,13 ± 0,54**

Лимфоциты, x109/л

1,44 ± 0,1

2,97 ± 0,17*

2,93 ± 0,54*

2,84 ± 0,13*

Эозинофилы, x109/л

195 ± 40

612 ± 120*

701 ± 105*

704 ± 103*

IgG, мг/мл

14,5 ± 0,5

13,41 ± 1,7*

13,7 ± 1,3*

14,8 ± 0,3*

IgM, мг/мл

2,18 ± 0,22

2,15 ± 0,38**

2,17 ± 0,42*

2,27 ± 0,35*

IgA, мг/мл

1,75 ± 0,14

2,16 ± 0,25*

2,21 ± 0,24*

2,28 ± 0,71*

ЦИК, ус. ед.

44 ± 3,5

53,51 ± 9,1**

61,71 ± 8,7*

64,12 ± 3,7*

Фагоцитарная активность, %

92 ± 2,2

69,5 ± 5,76*

51,2 ± 4,12*

54,4 ± 4,47*

Высокоавидные антитела, %

95 ± 2

18,4 ± 1,53*

14,2 ± 0,1**

12,5 ± 4,2*

Низкоавидные антитела, %

5 ± 1,2

71,6 ± 1,63*

85,8 ± 0,17*

87,5 ± 4,2*

 

Секреция низкоавидных антител G класса с аномальной конформа­ци­ей, низкой функциональной активностью, как было показано нами ранее, при­водит к ряду последствий, среди которых наиболее важным в патогене­ти­ческом отношении является образование с антигеном мелких растворимых дли­тельно циркулирующих в крови иммунных комплексов, неспособных акти­визировать классический путь системы комплемента и подключать кас­кад клеточно-опосредованных меха­низ­мов защиты. Такие мелкие раствори­мые ЦИК обладают цитофиль­ностью, т.е. способностью к связыванию с тка­нями. Именно в силу этих причин можно считать, что аллергены и атопены, длительно циркулирующие в крови, ведут к гиперактивации В- и Т-звеньев иммунитета и супрессии антибактериальной активности макрофагальных клеток. С позиции нарастания низкоавидных IgG становятся объяснимыми персистенция в организме аллергенов и атопенов.

Таким образом, патогенез АД можно рассматривать как цепь взаимо­связанных механизмов, среди которых триггерная роль принадлежит недос­та­точности протективной функции В-системы иммунитета, связанной с сек­ре­цией антител G класса с низкими авидитетом и протективной актив­ностью, при этом аллерген-специфические CD Th 2 клоны лимфоцитов выс­тупают в качестве эффекторного звена, подключающего клеточно-опосредованные ме­ха­низмы аллергического воспаления дермы.

 

Выводы

 

Установлено, что у больных АД независимо от степени тя­жес­ти забо­лева­ния в крови происходит резкое снижение высокоавидных (до 12-25%) и нарастание низкоавидных (до 75-88%) антител G класса с аномаль­ной кон­формацией и низкой функциональной и протективной активностья­ми, что свидетельствует о нарушении протективной функции В-системы им­му­нитета. Супрессия протективной функции В-системы иммунитета, патоге­не­ти­чес­ки связанная с расстройствами фолдинга антител в плазматических клет­ках, позволяет отнести АД к заболеваниям группы вариабельной иммун­ной недостаточности. Открывается возможность для разработки способов ле­чения и профилак­тики аллергических и атопических заболеваний путем кор­рекции протек­тив­ной функции В-системы иммунитета.

 

Литература

 

1.                  Пыцкий В.И. Атопическая болезнь // Сб. трудов, Современные пробле­мы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. Материалы первой научной конференции РАКИ, ВИНИТИ РАН. – 1997. – с. 38- 45.

2.                  Виноградов А.И., Балаболкин И.И., Виноградова Н.А. Содержание эй­козаноидов у детей с атопическим дерматитом // Педиатрия, 1991, № 10, с. 29-32.

3.                  Leuhg D. Atopic dermatitis: immunobiology and treatment with immune mo­dulators // Clin. Exp. Immunol. – 1997. – vol. 107 (Suppl. 1). – p. 25-30.

4.                  Кабулов Г.Г. Распространенность симптомов атопического дерматита в регионах Азербайджана // Биомедицина, № 2, 2007, с. 16-19.

5.                  Булина О.В., Горланов И.А., Калинина Н.М. Параметры цитокинового звена иммунитета у детей старшего возраста при атопическим дерма­ти­те // Аллергология, 2004, № 1, с. 27-30.

6.                  Бережная Н.М. В-лимфоциты и патогенез атопических заболеваний // Internatiuonal Journal Immunoreabilitation. – 1997. – N. 6. – P. 101-108.

7.                  Эфендиев А.М., Помойнецкий В.Д. Методические указания к ко­ли­че­ственному анализу простагландинов, тромбоксана, простациклина и цик­лических нуклеотидов в биологических жидкостях и тканях. – Баку, 1984, 42 с.

8.                  Петрив Р.В., Лопухин Ю.М., Чередеев А.Н. и др. Оценка иммунного статуса человека: Методическая рекомендация. – Москва, 1984, 123 с.

9.                  Клиническая иммунология и аллергология: Под. Ред. Л.Йегера. – Пер. с нем. – 2-ое изд. – Москва, Медицина, 1990. - Т. 1. – 528 с.

 

Поступила в редакцию 13.05.2009 г.

2006-2018 © Журнал научных публикаций аспирантов и докторантов.
Все материалы, размещенные на данном сайте, охраняются авторским правом. При использовании материалов сайта активная ссылка на первоисточник обязательна.